Přehled Metod Testování Na Chřipku

2023 Autor: Stephanie Arnold | [email protected]. Naposledy změněno: 2023-11-26 09:30

• Přehled
• Testy na chřipkový virus
• Rychlé molekulární testy
• Další molekulární testy
• Rychlé chřipkové diagnostické testy
• Imunofluorescence
• Virová kultura
• Sérologické testování
• Nové infekce chřipky typu A
• Reference

Přehled

Testování viru chřipky není nutné k provedení klinické diagnózy chřipky u ambulantních pacientů s podezřením na chřipku, zejména při zvýšené chřipkové činnosti, kdy v místní komunitě cirkulují sezónní chřipky A a B. Testování viru chřipky však může informovat klinické vedení, pokud výsledky mohou ovlivnit klinická rozhodnutí, jako je to, zda zahájit antivirovou léčbu, provést jiné diagnostické testování nebo zavést preventivní a kontrolní opatření proti chřipce. Testování na virus chřipky se doporučuje všem pacientům s podezřením na chřipku, kteří jsou přijímáni do nemocnice. Nejdůležitější je, aby lékaři pochopili omezení testů na virus chřipky a jak správně interpretovat výsledky, zejména negativní výsledky. Během vypuknutí respiračního onemocnění v uzavřeném prostředí (např. Nemocnice, zařízení dlouhodobé péče, výletní loď, internátní škola, letní tábor) může být testování infekce virem chřipky velmi užitečné při určování, zda je příčinou ohniska influenza.

Testy na chřipkový virus

Diagnostické testy dostupné pro detekci chřipkových virů v respiračních vzorcích zahrnují molekulární testy (včetně rychlých molekulárních testů, polymerázové řetězové reakce s reverzní transkripcí (RT-PCR) a dalších testů amplifikace nukleových kyselin); a testy detekce antigenu (včetně rychlých chřipkových diagnostických testů a imunofluorescenčních testů). Virová kultura je důležitá pro účely veřejného zdraví, ale neposkytuje včasné výsledky k informování klinického managementu. Citlivost a specificita jakéhokoli testu na chřipkové viry v respiračních vzorcích se může lišit v závislosti na typu testovací metody a konkrétním použitém testu, době od počátku nemoci po odběru vzorku, kvalitě odebraného vzorku, zdroji respiračního zdroje vzorku, manipulaci a zpracování vzorku a doba od odběru vzorku do testování. Pravděpodobnost nebo prediktivní hodnoty po testu (pozitivní a negativní prediktivní hodnoty) testu na chřipkový virus závisí na výskytu cirkulujících sezónních chřipkových virů v populaci pacientů a na specifických charakteristikách testu (citlivost a specificita) ve srovnání se „zlatým standardem“”Srovnávací test (molekulární test nebo virová kultura). Stejně jako u jiných diagnostických testů by měly být výsledky hodnoceny v souvislosti s dalšími klinickými a epidemiologickými informacemi, které mají poskytovatelé zdravotní péče k dispozici. Sérologické testování neposkytuje včasné výsledky k informování o rozhodnutích o klinickém řízení.

Společnost Infectious Diseases Society of America (IDSA) doporučuje použití rychlých molekulárních testů na chřipku oproti rychlým diagnostickým testům na chřipku (RIDT) pro detekci chřipkových virů v respiračních vzorcích ambulantních pacientů. IDSA doporučuje použití RT-PCR nebo jiných molekulárních testů pro detekci chřipkových virů v respiračních vzorcích hospitalizovaných pacientů. Doporučení týkající se testování na chřipku a informace o interpretaci výsledků testování naleznete v části Pokyny pro klinické praxe týkající se chřipky IDSA.

Tabulka 1: Metody testování viru chřipky

Začátek stránky

Rychlé molekulární testy

Rychlé molekulární testy jsou druhem diagnostického testu molekulární chřipky k detekci nukleových kyselin viru chřipky ve vzorcích horních cest dýchacích s vysokou citlivostí (90–95%) a specificitou. K dispozici jsou rychlé molekulární testy s FDA, které vedou k výsledkům za přibližně 15 až 30 minut. Některé z těchto rychlých molekulárních testů jsou upuštěny od CLIA pro použití v místě péče.

Další molekulární testy

Reverzní transkripce-polymerázová řetězová reakce (RT-PCR) a další molekulární testy mohou identifikovat přítomnost chřipkové virové RNA nebo nukleových kyselin v respiračních vzorcích s velmi vysokou citlivostí a specificitou. Některé molekulární testy jsou schopny detekovat a rozlišovat mezi infekcemi viry chřipky A a B; jiné testy mohou identifikovat specifické podtypy viru sezónní chřipky A [A (H1N1) pdm09 nebo A (H3N2)]. Tyto testy mohou vést k výsledkům za přibližně 45 minut až několik hodin v závislosti na testu. Zejména detekce chřipkové virové RNA nebo nukleových kyselin těmito testy nemusí nutně znamenat detekci životaschopného infekčního viru nebo probíhající replikaci viru chřipky. Je důležité si uvědomit, že ne všechny testy byly schváleny FDA pro diagnostické použití. K dispozici je několik multiplexních molekulárních testů, které mohou detekovat nukleové kyseliny viru chřipky a odlišit infekci virem chřipky od jiných respiračních patogenů a mohou být také užitečné pro řízení pacientů s těžkou imunosupresí nebo pro použití při identifikaci příčiny institucionálního vzplanutí respiračních chorob.

Začátek stránky

Rychlé chřipkové diagnostické testy

Rychlé chřipkové diagnostické testy (RIDT) jsou testy detekce antigenu, které mohou detekovat chřipkové virové antigeny za 10-15 minut se střední citlivostí (50-70%) a vysokou specificitou. Některé testy nepodléhají CLIA a jsou schváleny pro použití v jakémkoli ambulantním prostředí, zatímco jiné musí být použity v středně složité klinické laboratoři. Některé RIDT využívají čtecí zařízení analyzátoru pro standardizaci výsledků pro zlepšení citlivosti (75-80%). FDA nyní vyžaduje RIDT k dosažení 80% citlivosti. Detekce antigenu chřipkového viru nemusí nutně znamenat detekci životaschopného infekčního viru nebo probíhající replikaci viru chřipky.

Žádný z rychlých diagnostických testů na chřipku neposkytuje žádné informace o podtypech viru chřipky A. Druhy vzorků přijatelných pro použití (tj. Nosohltanu nebo nosní aspiráty, výtěry nebo výplachy) se také liší podle testu. Specifičnost a zejména citlivost rychlých chřipkových diagnostických testů jsou nižší než u virové kultury a RT-PCR a liší se podle testu. Většina rychlých diagnostických testů na chřipku, které mohou být provedeny v ordinaci lékaře, je přibližně 50-70% citlivých na detekci antigenů viru chřipky a více než 90% specifických. Nedávno FDA překlasifikoval RIDT a zveřejnil požadavky na zvýšenou přesnost, včetně vyšší citlivosti. Testy s nízkou až střední citlivostí a vysokou specifičností mohou vést k falešně negativním výsledkům častěji než k falešně pozitivním výsledkům, zejména během maximální aktivity chřipky v komunitě. Vzhledem k nízké citlivosti rychlých diagnostických testů na chřipku by lékaři měli zvážit potvrzení negativních výsledků testů s molekulárními testy, zejména během období maximální aktivity chřipky v komunitě a / nebo během podezření na ohniska institucionální chřipky z důvodu možnosti falešně negativních výsledků RIDT. Naproti tomu falešně pozitivní výsledky RIDT jsou méně pravděpodobné, ale mohou nastat a jsou častější během období nízké chřipkové aktivity. Při interpretaci výsledků rychlého diagnostického testu na chřipku by proto lékaři měli zvážit tento test v kontextu úrovně chřipkové aktivity v jejich komunitě (viz Algoritmus, který pomáhá při interpretaci výsledků testování na chřipku a při klinickém rozhodování během období). pokud viry chřipky cirkulují v komunitě a algoritmus, který pomáhá při interpretaci výsledků testování chřipky a při klinickém rozhodování v obdobích, kdy chřipkové viry NEBUDOU v komunitě pro další informace). Podrobnější informace o použití rychlých diagnostických testů na chřipku by měly být konzultovány s příbalovými informacemi a laboratoří provádějící test.

Začátek stránky

Imunofluorescence

Imunofluorescenční testy jsou testy detekce antigenu, které obecně vyžadují použití fluorescenčního mikroskopu k dosažení výsledků za přibližně 2 až 4 hodiny se střední citlivostí a vysokou specificitou. K detekci virových antigenů chřipky A a B ve vzorcích dýchacích cest jsou k dispozici jak barvicí testy přímé (DFA), tak nepřímé fluorescenční protilátky (IFA). Subtypování nebo další identifikace virů chřipky A není možné pomocí imunofluorescenčních testů. Jedním rychlým imunofluorescenčním testem je RIDT a používá analyzátorové zařízení k dosažení výsledků přibližně za 15 minut.

Virová kultura

Výsledky virové kultury nepřinášejí včasné výsledky k informování klinického managementu. Výsledky tkáňové kultivace skořápek mohou trvat 1-3 dny, zatímco tradiční kultivační výsledky tkáňových buněk mohou trvat 3-10 dní. Virová kultura však umožňuje rozsáhlou antigenní a genetickou charakterizaci chřipkových virů. Odběr některých vzorků dýchacích cest pro virovou kulturu je nezbytný pro sledování a antigenní charakterizaci nových kmenů sezónní chřipky A a B, které mohou být zahrnuty do příštího roku vakcíny proti chřipce.

Začátek stránky

Sérologické testování

Sérologické testování na chřipku se pro klinické rozhodování nedoporučuje. Ačkoli to nabízejí některé komerční laboratoře, výsledky sérologických testů na protilátky proti virům chřipky A nebo B na jediném vzorku séra nelze spolehlivě interpretovat. Řádné sérologické testování pro diagnostiku chřipky vyžaduje spárované akutní a zotavující se séra odebraná po 2-3 týdnech, se spolehlivým testováním v omezeném počtu laboratoří veřejného zdraví nebo výzkumných laboratoří, aby bylo možné posoudit čtyřnásobné nebo větší zvýšení protilátek specifických pro kmen viru chřipky. Sérologické testování na chřipku proto neposkytuje včasné výsledky, které by pomohly při rozhodování v klinické praxi, a nedoporučuje se, s výjimkou výzkumů a vyšetřování veřejného zdraví.

Nové infekce chřipky typu A

Pokud je podezření na infekci člověka novým virem influenza A živočišného původu (např. Virus influenza ptáků A nebo virus prasečí chřipky A), mělo by být kontaktováno místní a státní zdravotnické oddělení, aby provedlo RT-PCR pro sezónní chřipkové viry a nové viry chřipky A. Komerčně dostupné diagnostické testy na chřipku specificky nezjistí nové viry chřipky A a pozitivní výsledek viru chřipky A nemůže odlišit sezónní virus chřipky A od infekcí virem influenzy ptáků nebo prasat. Informace o nových virech chřipky A jsou k dispozici na adrese:

• Testování, hlášení a informace o laboratoři
• Prozatímní pokyny pro odběr vzorků, jejich zpracování a testování u pacientů s podezřením na infekci novými viry chřipky typu A spojenými se závažnou nemocí u lidí
• Dočasné vedení lékařů o infekcích člověka s variantami chřipkových virů
• Tabulka 1: Metody testování viru chřipky

Začátek stránky

Reference

Merckx J, Wali R, Schiller I, Caya C, Gore GC, Chartrand C, Dendukuri N, Papenburg J. Diagnostická přesnost nových a tradičních rychlých testů na infekci chřipkou ve srovnání s reverzní transkriptázovou polymerázovou řetězovou reakcí: systematický přehled a metaanalýza. Ann Intern Med. 19. září 2017; 167 (6): 394-409.